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“硫代葡萄糖苷-黑芥子酶”体系的HPLC检测服务开通啦!

发布日期:2019-07-15 15:00 浏览次数:

硫代葡萄糖苷(Glucosinolates)是植物体内一类重要的次级代谢产物,硫代葡萄糖苷可以作为抗微生物剂,杀虫剂和天然熏蒸消毒剂,它是由一分子葡萄糖和一个含硫的侧链R基经β-糖苷键连接而成。根据侧链R基氨基酸来源的不同可以将它分成吲哚族,脂肪族和芳香族硫代葡萄糖苷三类,其中脂肪族和芳香族研究比较广泛。萝卜硫苷(Glucoraphanin)是一种重要的脂肪族硫代葡萄糖苷,胞内酶黑芥子酶(EC 3.2.3.1)在细胞结构遭到破坏,被释放出来与底物萝卜硫苷接触,在水存在的情况下,中性条件(pH=5-8),发生水解反应并进行分子内重排,生成萝卜硫素(Sulforaphane,又名莱菔硫烷)。萝卜硫素是迄今为止发现的最强的PhaseⅡ酶诱导剂,可以有效抵抗食品中和环境中的有毒物质的致癌作用,因此是蔬菜中防癌,抗癌效果最好的天然活性物质之一。我司对其中萝卜硫苷(Glucoraphanin),黑芥子酶(EC 3.2.3.1),萝卜硫素(Sulforaphane,又名莱菔硫烷)三种物质不同的性质研发了有针对性的提取方法,并依赖HPLC的高灵敏性和准确度对其进行测定。

Fig.1
如图Fig.1中,我司为了防止萝卜硫苷在黑芥子酶的催化下水解,对样本进行高温灭活,再对样本进行研磨提取,保证萝卜硫苷测试的准确性。
Fig.2
如图Fig.2中,我司用黑介子硫苷酸钾(sinigrin)标准品作为底物,用HPLC测定特定时间内黑芥子酶催化反应前后sinigrin标准品的减少量来表征黑芥子酶的活性。
Fig.3
如图Fig.3,通过研磨,萝卜硫苷和黑芥子酶得以接触,在37℃下,中性环境中发生酶解反应,再对莱菔硫烷进行测试。
我司对植物组织中普遍存在的“硫代葡萄糖苷-黑芥子酶”体系中的三种物质,根据他们不同的性质,研发了相对应的提取方法,并依赖HPLC的高灵敏性和准确度对其进行测定,并取得了良好的测试结果,欢迎大家踊跃咨询。


 

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